Jsem odborníkem ve smyslu §2a Zákona č. 40/1995 Sb., o regulaci reklamy, ve znění pozdějších předpisů, čili jsem osobou oprávněnou léčivé přípravky, zdravotnické prostředky nebo diagnostické zdravotnické prostředky in vitro předepisovat nebo vydávat anebo poskytovat zdravotní služby, nebo jsem zaměstnancem poskytovatele zdravotních služeb.
Před vstupem do článku je nutné potvrdit seznámení se s oběma riziky.
101 kroků: Krájení
Krok 31: Používat kvalitní žiletky a nože
Pro krájení je nutné vždy používat vysoce kvalitní a ostré žiletky.
Pokud je v řezech přítomno velké množství jemných rýh, je to známka toho, že jsou čepelky již tupé a že je třeba je vyměnit.
Obr: A) Řez sleziny (H&E), na kterém je patrno mnoho jemných rýh, které vznikly použitím vadné žiletky. B) Řezy biopsie kůže plovoucí na vodní lázni. Již zde je viditelné poškození vadnou žiletkou.
Krok 32: Optimalizovat úhel náklonu nože
Úhel sklonu nože musí být vždy správně nastaven pro každý typ mikrotomu i žiletky.
Úhel sklonu nože není při změnách podmínek (jiný mikrotom, nový typ čepele, jiné zalévací médium atd.) nikdy upravován.
Obr:Tato série řezů byla nakrájena z vychlazeného bloku, a přesto řezy vykazují značnou kompresi (30-40%). V tomto případě stačí změnit úhel náklonu žiletky.
Krok 33: Pečlivě skrájet bločky
Bločky jsou pečlivě skrajovány tak, aby došlo k odhalení tkáně. Dalším skrojením je vyrovnán povrch vzorku a tkáň je prokrojena do požadované hloubky.
Bločky jsou kvůli úspoře času skrájeny jen nahrubo, nejsou prokrájené a jejich povrch je nerovný.
Obr: Počáteční nešetrné skrajování vylámalo fragmenty tkáně viditelné v přehledném barvení (H&E).
Krok 34: Zamezit poškození mrazem
Bločky jsou chlazeny na studeném mokrém povrchu a při krájení jsou vychlazené.
Bločky jsou před krájením zmrazeny, což někdy zapříčiní jejich prasknutí.
Obr: Blok před krájením přemražený v -15°C. Je vidět popraskaný parafín kolem tkáně. Trhliny mohou způsobit obtížnější krájení a napínání, protože parafín nepřiléhá ke tkáni.
Krok 35: Používat studené bločky
Bločky jsou při krájení vždy vychlazené.
Občas se může stát, že se blok delším stáním mimo chladící podložku opět ohřeje, což může vést k nadměrnému shrnutí řezů.
Obr. : A) Deformace glomerulů v této části ledvin je způsobena nadměrnou kompresí řezu při krájení (H&E). B) Řezy z tohoto bloku napnuté na vodní lázni. Řezy vlevo byly krájeny z nevychlazeného bloku. Řezy vpravo jsou krájeny z chlazeného bloku.
Krok 36: Krájet pomalu
Krájení probíhá pomalu, šetrně a rovnoměrně.
Krájení je rychlé, probíhá ve spěchu a s vědomím, že případné shrnutí řezu lze napravit v napínací lázni.
Obr: A) Krysí játra (barvení na retikulin) jsou křehká tkáň, vykazují jemné rýhy, které vznikly příliš rychlým krájením studeného bloku. Podobným problémům je možné předejít tím, že blok nebude příliš studený a zároveň bude pomaleji krájen. Někdy jsou tyto drobné rýhy způsobeny špatně utaženou žiletkou v držáku. B) Přehledné barvení H&E ukazuje, co udělá rychlé krájení. Obarvená žlazová tkáň ukazuje jemné rýhování, které vzniklo rychlým krájením přechlazeného bloku.
Pro krájení je nutné vždy používat vysoce kvalitní a ostré žiletky.
Pokud je v řezech přítomno velké množství jemných rýh, je to známka toho, že jsou čepelky již tupé a že je třeba je vyměnit.
