<<< Imunofluorescenční pracovní postup obsah Průkopníky v technologii IHC/IF >>>
Podle níže uvedených jednoduchých kroků vyberte pro Váš experiment nejvhodnější způsob označování a detekce.
1. Vyberte primární protilátku⯈ Specifickou pro váš antigen ⯈ Zvažte druh tkáně a její přípravu (fixaci) ⯈ Zvažte požadavky na odmaskování antigenu ![]()
Blokovací činidla⯈ Volby určené variantami vybranými v krocích 1-2 ⯈ Streptavidin/biotin blokovací kit ⯈ (pokud používáte biotin/streptavidinový systém) ⯈ Avidin/biotin blokovací kit ⯈ Normalní sérum (z druhu sekundární protilátky) ⯈ M.O.M. (Myš na myš) blokovací činidlo ⯈ R.T.U. Animal-Free blokovací činidlo a ředidlo ⯈ BSA ⯈Roztok kaseinu |
2. Vyberte sekundární protilátku a terciální detekční systém⯈ Vyberte fluorofor na základě vlnových délek filtrů v mikroskopu ⯈ Fluorofor-konjugovaná sekundární protilátka nebo biotinylovaná sekundární protilátka ⯈ Zvažte požadavky na citlivost ⯈ Zvažte druh primární protilátky ⯈ Zvažte druh tkáně Varianta A
Jeden krok ⯈ Fluoroforem konjugované sekundární protilátky ⯈ VectaFluor R.T.U. DyLight značené sekundární protilátky Varianta B
Jeden krok ⯈ VectaFluor Duet IF kity pro dvojité značení Varianta C
Dva kroky ⯈ Založené na biotinu. ⯈ Biotinylovaná sekundární protilátka a fluorofor konjugovaný s avidinem nebo streptavidinem. ⯈ Viz krok 3 pro dodatečné zesílení
Varianta D
Dva kroky ⯈ Nejvyšší citlivost. Není založen na biotinu. ⯈ VectaFluor Excel Amplifikovaný fluorescenční barvicí systém (amplifikační linker + fluorescenční terciální protilátka)
|
3. Zvolte zesílení signálu pomocí systémů na bázi
|
4. Snížení autofluorescence způsobené fixací aldehydy⯈ TrueVIEW kity zhášející autofluorescenci s kontrastním barvením DAPI či bez něj
|
5. Vyberte montovací medium s nebo bez kontrastního barvení⯈ VECTASHIELD Antifade montovací medium, s kontrastním barvením jader nebo bez něj |
6. Vizualizace⯈ Fluorescenční mikroskop ⯈ Prohlížejte pomocí vhodných excitačních/emisních filtrů ![]()
|
<<< Imunofluorescenční pracovní postup obsah Průkopníky v technologii IHC/IF >>>
Ozvěte se nám.