Výběr nejlepších protilátek: Nordic Biosite

vytvořeno: 15.5.2019

 

logo Nordic Biostie

I když bylo obtížné zvolit jen čtyři protilátky od tohoto nového dodavatele, naše aplikační specialistka vybrala ty, které mohou být pro diagnostiku zásadní, a přitom jejich kvalita kolísá od výrobce k výrobci, ačkoliv se třeba jedná o jeden klon. Jde přitom o protilátky, které se používají na denní bázi při základní diagnostice. Nordic Biosite svoje protilátky testuje v NordiQC a pokud jejich výsledek není optimální, dále na nich pracuje. Navíc výrobce poskytuje vzorky, na kterých si můžete vyzkoušet, jak protilátky vypadají v praxi ve Vašich podmínkách.

CYTOKERATIN

Klon BS5 je robustní klon, který má na rozdíl od některých koktejlů AE1/AE3 správný poměr detekce nízko i vysokomolekulárních cytokeratinů.

Základní marker epiteliální diferenciace. Zahrnuje všechny subtypy cytokeratinů a je proto vhodný pro základní diagnostiku jako CK pan marker.

Kontrolní tkání jsou játra.

 

Protokoly, které vyhověly kritériím na optimální barvení, byly založeny na pretreatmentu v pH9 a ředění se pohybovalo kolem 1:200. Klon vyhovuje jak manuálnímu protokolu, tak automatickému zpracování.

CYTOKERATIN 20

Klon BS101 poskytuje stejně kvalitní jako barvení jako polyklonální protilátka E16444 od SpringBio, která je považována za nejlepší pro průkaz CK20 ve tkáni. Bohužel není dostupná s IVD certifikátem a proto je skvělé, že existuje tato vynikající alternativa pro klinické použití.

Marker diferenciace zejména nádorů ze žaludku, střev a přechodného epitelu. 

Kontrolní tkání je appendix.

 

Protokoly, které vyhověly kritériím na optimální barvení, byly založeny na pretreatmentu v pH9 a ředění se pohybovalo kolem 1:200. Klon vyhovuje jak manuálnímu protokolu, tak automatickému zpracování.

PHH3

Vyzkoušejte určitě klon BSR99 proti PHH3, dostanete silně pozitivní buňky v mitotické fázi bez pozadí a bez problémů, které se vyskytly v některých laboratořích používajících polyklonální protilátku.

Phosphohiston 3 – Histon 3 je specificky fosforylován jen při buněčném dělení. Nejvyšší fosforylace nastává v metafázi. Po výstupu buňky z mitózy dochází k defosforylaci a tedy buňka není pro protilátku již rozeznatelná. Barvení tedy poskytuje mnohem lepší způsob počítání mitotického indexu oproti počítání z H&E.

Kontrolní tkání je tonsila.

 

Protokoly, které vyhověly kritériím na optimální barvení, byly založeny na pretreatmentu v pH9 a ředění se pohybovalo kolem 1:100. Klon vyhovuje jak manuálnímu protokolu, tak automatickému zpracování.

SYNAPTOFYZIN

Pro synaptofyzin je nejčastěji používán myší klon 27G12 (Leica), který dlouhodobě vychází v NordiQC dobře. Zásadní je správná titrace, aby bylo dosaženo detekce slabých expresí neuroendokrinních nádorů. Klon od Nordic Biosite BS15 je velmi zajímavý a pokud nejste spojeni se stávající protilátkou, určitě vyzkoušejte tuto.

Synaptofyzin je senzitivní marker používaný nejčastěji k identifikaci nádorů z neuroendokrinních buněk. Není tak specifický jako chromogranin A, ale je jeho vhodným doplňujícícm vyšetřením. Také se používá k identifikaci tumorů pocházejících z kůry nadledvin. Je trochu záludný při titraci. Přímo se nabízí mít jako kontrolu pankreas nebo nadledvinu, ale tyto kontroly jsou svou silnou pozitivitou zavádějící.

Kontrolní tkání je colon.

 

Protokoly, které vyhověly kritériím na optimální barvení, byly založeny na pretreatmentu v pH9 a ředění se pohybovalo kolem 1:100. Klon vyhovuje jak manuálnímu protokolu, tak automatickému zpracování.

 

Prezentace produktů společnosti Akoya

Prezentace produktů společnosti Akoya

Srdečně Vás zveme na květnovou prezentaci produktů pro multiplexovou imunofluorescenci a prostorovou fenotypizaci buněk společnosti Akoya. Představení proběhne 10.5. v Praze a 11.5. v Brně.

více informací
100 markerů na jednom řezu? – Ultrahiplex mIF od společnosti Akoya

100 markerů na jednom řezu? – Ultrahiplex mIF od společnosti Akoya

Nejen těm, kteří se zajímají o fenotypizaci buněk, ale také těm, kteří se zabývají IHC a IF, přinášíme nové produkty a přístroje od společnosti Akoya.

více informací
Snížení autofluorescence tkáně a významné zvýšení podílu signálu k šumu – Vector Laboratories

Snížení autofluorescence tkáně a významné zvýšení podílu signálu k šumu – Vector Laboratories

Imunofluorescence (IF) je jednoduchá, nicméně účinná metoda k vizualizaci exprese proteinů v tkáních či buňkách pomocí protilátek konjugovaných s fluoroforem. Tato technika však vyžaduje optimalizaci a důkladné pochopení, abychom dosáhli rovnováhy mezi pěknou strukturou zabarvení a šumem pozadí. Není nic horšího, než když po potenciálně celodenním barvicím protokolu, jemuž předcházela obšírná preparace tkáně, experimentální příprava apod., nahlédnete do mikroskopu a v něm vidíte pouze šum pozadí či nespecifické zabarvení. Tento článek si klade za cíl být průvodcem při rozpoznání problému s autofluorescencí, představit některé její potenciální příčiny a poučit o technikách, jimiž lze autofluorescenci potlačit či eliminovat tak, abyste dosáhli krásného a vysoce kvalitního fluorescenčního barvení. (Tento článek může obsahovat prvky reklamy dle definice zákona č. 40/1995 Sb.)

více informací