Výběr nejlepších protilátek: Leica Novocastra

vytvořeno: 24.9.2019

Leica Novocastra

Leica je náš největší dodavatel materiálu do patologických provozů. Má celé spektrum přístrojů pro zpracování vzorků, velmi kvalitní mikroskopy a skenery skel. Protože mezi přístroje patří také imunostainer Bond, logicky k němu patří i primární protilátky.

 

bcl-6

Klon LN22 je z výběru současných čtyřech nejpoužívanějších protilátek proti bcl-6 nejlepší volbou. Protilátka nevykazuje citlivost na peroxid vodíku, a proto se hodí i pro automatizované provozy, kde nelze změnit pořadí kroků v protokolu.

 

Bcl-6 je marker diferenciace B-lymfomů. Potlačuje transkripci p53 a proto exprese p53 chybí v B-buňkách zárodečného centra, kde je Bcl-6 vysoce exprimována. Správně nastavený protokol detekuje nízké úrovně exprese např. skvamózní epiteliální buňky tonsil.

Kontrolní tkání je tonsila.

Protokoly, které vyhověly kritériím na optimální barvení, byly založeny na pretreatmentu v pH9 a ředění se pohybovalo kolem 1:100. Klon vyhovuje jak manuálnímu protokolu, tak automatickému zpracování, nejlépe za použití „tříkrokového“ detekčního systému, např. Leica Novolink.

PSA

PSA je marker diferenciace nádorů epitelu prostaty. Klon 35H9 je klonem se stabilně skvělými výsledky v NordiQC. Pokud hledáte myší klon pro jednoduché i dvojité barvení, neuděláte chybu.

Rovnoměrnou expresi PSA prokazujeme v normální tkáni prostaty v sekrečních epiteliálních buňkách a prostatických acinech. Epiteliální buňky vykazují gradient barvení s největší intenzitou v jejich apikální části. Bazální buňky, přechodný epitel nebo stromální buňky PSA neexprimují.
Kontrolní tkání je hyperplastická prostata, negativní ledvina nebo appendix.

Protokoly, které vyhověly kritériím na optimální barvení, byly založeny na pretreatmentu v pH9 a ředění začínalo 1:100. Klon vyhovuje jak manuálnímu protokolu, tak automatickému zpracování.

Progesteron receptor

Důležitý prediktivní marker nádorů prsu je třeba detekovat kvalitní protilátkou. Z dostupných protilátek se klon 16 umisťuje v NordiQC na prvních místech. Je to stabilně kvalitní klon, který rádi doporučujeme. Minimálně nebo vůbec nepřibarvuje cytoplasmu, což bývá problémem např. u klonu SP2, nebo falešně pozitivní buňky u klonu 1E2 (NQC).

Buněčné účinky progesteronu jsou zprostředkovány receptory progesteronu (PR). Funkční struktura tohoto receptoru je podobná struktuře estrogenového receptoru (ER), s poměrně velkou sekvenční homologií. Přítomnost funkčního ER je nutná pro syntézu PR v buňce, proto se obvykle u ER negativních nádorů PR nevyskytuje. PR existuje ve dvou izoformách, PR-A a PR-B. PR-A je hlavní izoforma v děložním stromatu a PR-B je dominantní izoforma v endometriálních žlázách. Normální tkáň mammy exprimuje PR-A a PR-B ve stejné poměru. Pokud je použit cervix jako kontrola, je třeba hledat silnou pozitivitu většiny epitelových a stromálních buněk a bazální musí vykazovat silnou a výraznou reakci jaderného barvení pouze s minimálním cytoplazmatickým barvením. Kalibrace tak markerů jako jsou PR nebo ER vyžaduje velmi kvalitní kontrolní blok.

Kontrolní tkání je cervix, ale vhodnější se jeví multiblok, kde bude cervix, tonsila (negativní kontrola) a pozitivní a negativní nádor mammy.

Protokoly, které vyhověly kritériím na optimální barvení, byly založeny na pretreatmentu v pH9 a ředění se pohybovalo od 1:150 pro manuální i automatické zpracování. Pro přístroj Ventana však začínalo ředění na 1:50.

S vyběrem i objednáním
vám rádi poradíme, ozvěte se.

Název produktu Klon Výrobce Katalogové číslo
bcl-6 protein LN22 Leica BCL-6-564-L-CE koupit
Progesterone receptor 16 Leica PGR-312-L-CE koupit
Prostate-specific antigen 35H9 Leica PSA-431-L-CE koupit

 

Prezentace produktů společnosti Akoya

Prezentace produktů společnosti Akoya

Srdečně Vás zveme na květnovou prezentaci produktů pro multiplexovou imunofluorescenci a prostorovou fenotypizaci buněk společnosti Akoya. Představení proběhne 10.5. v Praze a 11.5. v Brně.

více informací
100 markerů na jednom řezu? – Ultrahiplex mIF od společnosti Akoya

100 markerů na jednom řezu? – Ultrahiplex mIF od společnosti Akoya

Nejen těm, kteří se zajímají o fenotypizaci buněk, ale také těm, kteří se zabývají IHC a IF, přinášíme nové produkty a přístroje od společnosti Akoya.

více informací
Snížení autofluorescence tkáně a významné zvýšení podílu signálu k šumu – Vector Laboratories

Snížení autofluorescence tkáně a významné zvýšení podílu signálu k šumu – Vector Laboratories

Imunofluorescence (IF) je jednoduchá, nicméně účinná metoda k vizualizaci exprese proteinů v tkáních či buňkách pomocí protilátek konjugovaných s fluoroforem. Tato technika však vyžaduje optimalizaci a důkladné pochopení, abychom dosáhli rovnováhy mezi pěknou strukturou zabarvení a šumem pozadí. Není nic horšího, než když po potenciálně celodenním barvicím protokolu, jemuž předcházela obšírná preparace tkáně, experimentální příprava apod., nahlédnete do mikroskopu a v něm vidíte pouze šum pozadí či nespecifické zabarvení. Tento článek si klade za cíl být průvodcem při rozpoznání problému s autofluorescencí, představit některé její potenciální příčiny a poučit o technikách, jimiž lze autofluorescenci potlačit či eliminovat tak, abyste dosáhli krásného a vysoce kvalitního fluorescenčního barvení. (Tento článek může obsahovat prvky reklamy dle definice zákona č. 40/1995 Sb.)

více informací